jueves, 19 de enero de 2012

Prácticas de laboratorio


PRACTICA SOBRE LA REALIZACIÓN Y OBSERVACIÓN DE UN CARIOTIPO HUMANO.

FUNDAMENTO TEÓRICO
Cariotipo: Conjunto de cromosomas de cada especie, ordenado según su tamaño, forma y características
El cariotipo de la especie humana consta de 46 cromosomas, de los cuales dos determinan el sexo:
XX: femenino, XY: masculino
Morfología cromosómica: Los cromosomas se describen según su aspecto durante la metafase, en ellos podemos distinguir las siguientes partes:


Clasificación de los cromosomas según la posición del centrómero:
ü  Metacéntricos: los dos brazos de igual longitud
ü  Submetacéntricos: un brazo ligeramente más largo que el otro
ü  Acrocéntricos: brazos con muy diferente longitud
ü  Telocéntricos: Presenta un único brazo distinguible, el centrómero se sitúa en un extremo
Clasificación de los cromosomas en función de su respuesta a los colorantes
ü  Eucromáticos: cromosomas o segmentos de los mismos que tienen las propiedades normales de tinción.
ü  Heterocromáticos: se tiñen de forma diferente en su totalidad o en algunos segmentos
ü  Las regiones heterocromáticas se manifiestan en formas de bandas y son características de cada cromosoma y por lo tanto lo identifican
ü  Se pueden utilizar distintos métodos de tinción, uno de los más utilizados es al tinción Giemsa que da lugar a las bandas G.

OBJETIVO
Realización y observación de un cariotipo humano

MATERIAL
-          Tijeras                                                     -  Pegamento
-          Plantilla de un cariotipo humano                 -  Plantilla de cromosomas
-          Plantilla de idiograma humano                                                                                 

PROCEDIMIENTO
1.      Observar la plantilla de cromosomas, corresponden al cariotipo humano masculino y femenino
2.      Recorta los cromosomas y ordénalos de manera semejante a como se realizó en la plantilla del cariotipo humano
3.      Pégalos en la plantilla de idiograma humano y señala si corresponde al sexo masculino o femenino

ANÁLISIS Y CONCLUSIONES
A)    Describe las características morfológicas de cada grupo de cromosomas de cariotipo humano
B)     Compara el aspecto de los cromosomas del cariotipo humano con los que tú has recortado, ¿puedes dar una explicación para justificar las diferencias?
C)     ¿Tiene algo que ver el  número de cromosomas de una especie con su tamaño?



PRÁCTICA SOBRE FENÓMENOS OSMÓTICOS
  
OBJETIVO
Observar al microscopio óptico los efectos que tiene en las células la existencia de distintas concentraciones en el medio extracelular y en el citoplasma

MATERIAL
-          Pipetas de 10ml
-          Tijeras
-          Vasos de precipitados de 50ml
-           Pinzas
-          Microscopio óptico
-          Portaobjetos
-          Balanza
-          Agua destilada
-          Cloruro sódico
-          1 cebolla

PROCEDIMIENTO
Antes de realizar el experimento, prepara en los vasos de precipitados cinco disoluciones de cloruro sódico con diferentes concentraciones (3 g/l, 6 g/l, 9 g/l, 12 g/l y 15 g/l), utilizando para ello agua destilada. Deberás anotar en cada vado la concentración correspondiente.
  1. Corta con las tijeras cinco trozos pequeños de la epidermis que tapiza el interior de las capas externas de la cebolla.
  2. Coloca un trozo de epidermis en cada uno de los vasos de precipitados y mantenlos sumergidos durante 15 minutos.
  3. Pasado ese tiempo, extrae los trocitos de epidermis con ayuda de las pinzas y obsérvalos directamente al microscopio.

ANÁLISIS Y CONCLUSIONES
A)    Con lentes de poco aumento, observa al microscopio el aspecto de las células de la epidermis que han estado sumergidas en las distintas disoluciones salinas.
B)     Elabora una tabla de resultados y dos gráficas en las que se representen porcentajes (en una de ellas de plasmólisis, y en otra, de turgencia) en relación con la concentración salina.
C)     ¿Por qué no se pueden preparar las disoluciones de cloruro sódico con agua del grifo?
D)    ¿A qué se deben los fenómenos observados?
E)     ¿Qué puedes decir sobre la concentración osmótica del citoplasma de las células de la epidermis de cebolla?
F)      ¿Se habrían obtenido los mismos resultados si se hubiera empleado un alga marina en el experimento?  



PRÁCTICA SOBRE LA OBSERVACIÓN DE BACTERIAS AL MICROSCOPIO ÓPTICO.


OBJETIVO
Observar al microscopio óptico bacterias

MATERIAL
-          Una disolución de bacterias                -  Cristal violeta
-          Agua destilada                                   -  Oxalato amónico
-           Yoduro potásico                                -  Yodo
-          Etanos                                               -  Safranina
-          Portaobjeto                                         -  Cubreobjetos
-          Microscopio
Nota: para realizar esta práctica, las bacterias se pueden obtener del:  yogur, dejando al aire recipientes en los cuales haya un medio nutritivo, extrayendo la película superficial de charcos o de agua estancadas…

PROCEDIMIENTO
ü  Se comenzará con la preparación de los colorantes.
  1. El principal se obtiene mezclando a partes iguales una disolución de cristal de violeta en etanol con otra de oxalato amónico en agua destilada:
DISOLUCIÓN A                                            DISOLUCIÓN B
Cristal de violeta 2 gr.                                    Oxalacetato amónico: 0,8 gr.
Etanol al 90%: 20 ml.                                     Agua destilada: 80 ml.
  1. Otro colorante es el lugol, que se prepara mezclando a partes iguales una disolución acuosa de yoduro potásico con otra disolución de yodo.
DISOLUCIÓN A                                            DISOLUCIÓN B
Yoduro potásico: 2 gr.                                    Yodo: 1 gr.
Agua destilada: 2 ml.                                      Agua destilada: 300 ml.
  1. El tercer colorante se prepara disolviendo safranina en agua:
Safranina al 25% en disolución alcohólica: 10 ml.
Agua destilada: 1.000 ml.
ü  El proceso será el siguiente:
o   Colocar sobre un portaobjetos bien limpio una gota de la disolución de bacterias y extenderla.
o   Dejar secar al aire y luego fijar calentando (a menos de 60º C) el portaobjetos con una llama, cuidando de que no llegue a quemar si se deja sobre el dorso de la mano. En el caso de que se haya puesto un poco de yogur extendido es conveniente echar alcohol sobre el portaobjetos para que arrastre la grasa del yogur.
o   Teñir con el colorante de cristal de violeta (filtrado) durante 90 segundos.
o   Lavar con agua destilada
o   Teñir con lugol, durante 2 minutos.
o   Lavar abundantemente con etanol y añadir agua destilada para lavar el alcohol
o   Teñir con safranina durante 2 minutos y lavar con agua corriente
o   Secar suavemente sin frotar con papel de filtro y observar al microscopio
ü  Se observará la presencia de bacterias de color azul, Gram + y de color rojo las Gram -.
Nota: las bacterias Gram + poseen un tipo de pare en el cual aparece el ácido teicoico, carecen de fosfolípidos y son especialmente abundantes en derivados glucídicos. Todas las clases de bacterias permiten el pase de cristal de violeta, que las tiñe de azul, ya que el etanol no puede entrar a lavarlo. Las bacterias Gram – son decoloradas por el etanol y más tarde quedan teñidas de rojo por la safranina.

ANÁLISIS Y CONCLUSIONES
A)    Observa las preparaciones (1) y (2) utilizando en primer lugar el objetivo más pequeño (4 aumentos) enfocando con el macro. Pasa después al siguiente objetivo (10 aumentos) enfocando con el micro.
B)     Haz dibujos de todo lo que observes
C)     Interpreta tus observaciones de acuerdo con tus conocimientos sobre la estructura de la célula vegetal y sobre los procesos osmóticos



Lugares interesantes para visitar

A continuación os detallo algunos lugares que me parecen interesantes para visitar y aprender que la Ciencia no está solo en los libros:

  • Arboreto Luis Ceballos, en San Lorenzo de El Escorial. Madrid.Se trata de un centro de Educación Ambiental perteneciente a la Red de centros de Educación Ambiental de la Consejería de Medio Ambiente y Ordenación del Territorio de la Comunidad de Madrid.  http://arboretoluisceballos.blogspot.com/



  • Museo Geominero, museo situado en la C/ Río Rosas, 23 en Madrid. Museo situado en el centro de Madrid donde puedes observar importantes colecciones de minerales, rocas y fósiles procedentes de todas las regiones de España. Entrada gratuita.  http://www.igme.es/museo/

Apuntes de Inmaculada Martín que podrían ser interesantes para alumnos de 1º de Bachillerato

REPRODUCCIÓN CELULAR

La reproducción celular cuya misión es perpetuar a las células, se realiza por división de una célula madre en dos células hijas y se produce mediante el llamado CICLO CELULAR.
El ciclo celular, es el periodo de crecimiento y divisiones celulares que tiene lugar durante el ciclo vital de una célula. Consta de dos etapas, una etapa de división y otra etapa de interfase.
Durante la etapa de división se dan a su vez dos procesos, la mitosis o etapa de división del núcleo y la citocinesis o etapa de división del citoplasma
La interfase es el periodo comprendido entre dos divisiones sucesivas, donde se produce la duplicación del ADN, la síntesis de proteínas, la reparación del ADN...

Cuando el núcleo de la célula se encuentra en división también llamado núcleo mitótico, se produce la condensación de la cromatina en cromosomas, ya visibles al microscopio óptico.
El número y la morfología de los cromosomas es característico de cada especie. En 1981, Lacadena definió los cromosomas como: el material hereditario cuya misión es conservar (de célula a célula), transmitir (de generación en generación) la información genética.

Los cromosomas están formados por:
  •  Dos filamentos, que son las cromátidas hermanas, "brazos" unidas por el
  • Centrómero o constricción primaria, la cuál incluye el cinetocoro, que son placas de naturaleza proteica donde se conectan los microtúbulos del huso mitótico.

 Imágenes de Foro de Genética de emagister.com.  Dibujo esquemático del cromosoma, y microfotografía electrónica de barrido de cromosoma en metafase


CICLO CELULAR
  • INTERFASE,  como ya he adelantado la interfase es el periodo comprendido entre dos divisiones sucesivas donde ocurren los siguientes procesos:
    • Prepara a la célula para la mitosis.
    • La síntesis o duplicación del ADN.
    • Los cromosomas se duplican y quedan formados por dos cromátidas iguales.
    • El citoplasma crece.
    • La relación nucleoplasmática alcanza su valor mínimo debido a que el núcleo no controla su metabolismo.

                 Vn         
      RNP = -------
                 Vc - Vn

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En la interfase del ciclo de división celular podemos distinguir tres períodos tal y como vemos en el dibujo:
G1.- Período activo donde ocurre la transcripción y traducción del ADN, dando lugar a proteínas necesarias para la vida celular y sintetizando las enzimas necesarias para la replicación del ADN.
Fase S.- Fase donde ocurre la duplicación del material genético, los cromosomas quedan formados por dos cromátidas, cada cromátida está formada por una doble hélice de ADN, como la replicación es semiconservativa, las dos dobles hélices hijas serán exactamente iguales.
G2.- Donde todos los componentes de la división celular se preparar para el proceso de división celular.
  • DIVISIÓN CELULAR,  es el proceso por el cuál cada célula madre produce dos células hijas, que reciben una dotación exacta de los cromosomas maternos, sea cual sea el número de éstos. Consta de dos fases, en una ocurre la división del núcleo proceso llamado cariocinesis o mitosis y en otra fase ocurre la división del citoplasma, la citocinesis
    • MITOSIS, durante este proceso se reparte equitativamente el material hereditario, el ADN va totalmente empaquetado y superenrollado, para que sea inaccesible a polimerasas y transcriptasas. Es un proceso continuo pero para su estudio se distinguen de forma artificial cuatro fases: Profase, metafase, anafase y telofase.
      • Profase, 
  • la cromatina del núcleo interfásico se organiza en filamentos, denominados cromosomas,
  • al inicio de la fase se duplican los centriolos que constituyen el centrosoma. 
  • Los microtúbulos organizados alrededor de cada  centrosoma forman los ásteres.
  • Los centrosomas se alejan progresivamente hacia lados opuestos del núcleo.
  • El conjunto de microtúbulos que se organizan entre los dos ásteres se denomina huso acromático o huso mitótico (las células de las plantas (angiospermas y gimnospermas carecen de centriolos, por lo que no forman ásteres y el huso acromático tiene forma de tonel).

http://ciclocelular.galeon.com/productos1503129.html 
  • El nucleolo desaparece progresivamente.
  • Los cromosomas se van acortando y se hacen cada vez más densos y coloreables.
  • Se observan las dos cromátidas que forman cada cromosoma unidas por el centrómero (no coloreable).
  • La membrana nuclear se desorganiza progresivamente hasta que acaba por desaparecer, quedando los cromosomas dispersos por el citoplasma.
  • Se forman las fibras cromosómicas, que son otros haces de microtúbulos que se disponen de forma perpendicular a los cromosomas, anclándose a cada lado del centrómero. 
      • Metafase

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  • Los cromosomas se encuentran en el máximo de su desarrollo, unidos a las fibras cromosómicas acaban desplazándose hasta situarse a igual distancia de cada polo. Colocan sus centrómeros y brazos perpendicularmente al eje, formado por los centrosomas, formando la placa metafásica o placa ecuatorial.

      • Anafase
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  • Debido a un desdoblamiento a nivel del centrómero, las dos cromátidas de cada cromosoma se separan y se dirigen hacia los polos. Son arrastrados por el acortamiento de las fibras cromosómicas del huso.
  • Los cromosomas hijos alcanzan los polos, los microtúbulos se desorganizan y sólo persisten haces paralelos en la región ecuatorial, que marca el plano por el cual se dividirá la célula.
      • Telofase,
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  • Los dos conjuntos de cromátidas situados en los polos se desorganizan, pierden su individualidad, reconstruyéndose de nuevo la cromatina.
  • El nucleolo reaparece, elaborado a nivel de ciertos cromosomas.
  • La membrana nuclear se reorganiza progresivamente.
  • La célula tiene dos núcleos con 2n cromosomas.


    • CITOCINESISse produce la división del citoplasma, donde el reparto de orgánulos citoplasmáticos y el tamaño de las dos nuevas células no tiene porque ser equitativo ni igual.
Al final del proceso, la célula entra en interfase, si esa célula ya no se va a dividir más, entra en lo que se denomina período G0, si por el contrario esa célula va a volver a dividirse entra de nuevo en el período G1 previo a la síntesis del ADN, e iniciándose en un nuevo ciclo ce división celular.

Webs con vídeos chulos sobre el ciclo celular y la mitosis.







Webs y Blogs interesantes