Prácticas de laboratorio

PRACTICA SOBRE LA REALIZACIÓN Y OBSERVACIÓN DE UN CARIOTIPO HUMANO.

FUNDAMENTO TEÓRICO

Cariotipo: Conjunto de cromosomas de cada especie, ordenado según su tamaño, forma y características

El cariotipo de la especie humana consta de 46 cromosomas, de los cuales dos determinan el sexo:

XX: femenino, XY: masculino

Morfología cromosómica: Los cromosomas se describen según su aspecto durante la metafase, en ellos podemos distinguir las siguientes partes:

Clasificación de los cromosomas según la posición del centrómero:

ü  Metacéntricos: los dos brazos de igual longitud

ü  Submetacéntricos: un brazo ligeramente más largo que el otro

ü  Acrocéntricos: brazos con muy diferente longitud

ü  Telocéntricos: Presenta un único brazo distinguible, el centrómero se sitúa en un extremo

Clasificación de los cromosomas en función de su respuesta a los colorantes

ü  Eucromáticos: cromosomas o segmentos de los mismos que tienen las propiedades normales de tinción.

ü  Heterocromáticos: se tiñen de forma diferente en su totalidad o en algunos segmentos

ü  Las regiones heterocromáticas se manifiestan en formas de bandas y son características de cada cromosoma y por lo tanto lo identifican

ü  Se pueden utilizar distintos métodos de tinción, uno de los más utilizados es al tinción Giemsa que da lugar a las bandas G.

OBJETIVO

Realización y observación de un cariotipo humano

MATERIAL

-          Tijeras                                                     -  Pegamento

-          Plantilla de un cariotipo humano                 -  Plantilla de cromosomas

-          Plantilla de idiograma humano                                                                                 

PROCEDIMIENTO

1.      Observar la plantilla de cromosomas, corresponden al cariotipo humano masculino y femenino

2.      Recorta los cromosomas y ordénalos de manera semejante a como se realizó en la plantilla del cariotipo humano

3.      Pégalos en la plantilla de idiograma humano y señala si corresponde al sexo masculino o femenino

ANÁLISIS Y CONCLUSIONES

A)    Describe las características morfológicas de cada grupo de cromosomas de cariotipo humano

B)     Compara el aspecto de los cromosomas del cariotipo humano con los que tú has recortado, ¿puedes dar una explicación para justificar las diferencias?

C)     ¿Tiene algo que ver el  número de cromosomas de una especie con su tamaño?

PRÁCTICA SOBRE FENÓMENOS OSMÓTICOS

  

OBJETIVO

Observar al microscopio óptico los efectos que tiene en las células la existencia de distintas concentraciones en el medio extracelular y en el citoplasma

MATERIAL

-          Pipetas de 10ml

-          Tijeras

-          Vasos de precipitados de 50ml

-           Pinzas

-          Microscopio óptico

-          Portaobjetos

-          Balanza

-          Agua destilada

-          Cloruro sódico

-          1 cebolla

PROCEDIMIENTO

Antes de realizar el experimento, prepara en los vasos de precipitados cinco disoluciones de cloruro sódico con diferentes concentraciones (3 g/l, 6 g/l, 9 g/l, 12 g/l y 15 g/l), utilizando para ello agua destilada. Deberás anotar en cada vado la concentración correspondiente.

1. Corta con las tijeras cinco trozos pequeños de la epidermis que tapiza el interior de las capas externas de la cebolla.
2. Coloca un trozo de epidermis en cada uno de los vasos de precipitados y mantenlos sumergidos durante 15 minutos.
3. Pasado ese tiempo, extrae los trocitos de epidermis con ayuda de las pinzas y obsérvalos directamente al microscopio.

ANÁLISIS Y CONCLUSIONES

A)    Con lentes de poco aumento, observa al microscopio el aspecto de las células de la epidermis que han estado sumergidas en las distintas disoluciones salinas.

B)     Elabora una tabla de resultados y dos gráficas en las que se representen porcentajes (en una de ellas de plasmólisis, y en otra, de turgencia) en relación con la concentración salina.

C)     ¿Por qué no se pueden preparar las disoluciones de cloruro sódico con agua del grifo?

D)    ¿A qué se deben los fenómenos observados?

E)     ¿Qué puedes decir sobre la concentración osmótica del citoplasma de las células de la epidermis de cebolla?

F)      ¿Se habrían obtenido los mismos resultados si se hubiera empleado un alga marina en el experimento?  

PRÁCTICA SOBRE LA OBSERVACIÓN DE BACTERIAS AL MICROSCOPIO ÓPTICO.

OBJETIVO

Observar al microscopio óptico bacterias

MATERIAL

-          Una disolución de bacterias                -  Cristal violeta

-          Agua destilada                                   -  Oxalato amónico

-           Yoduro potásico                                -  Yodo

-          Etanos                                               -  Safranina

-          Portaobjeto                                         -  Cubreobjetos

-          Microscopio

Nota: para realizar esta práctica, las bacterias se pueden obtener del:  yogur, dejando al aire recipientes en los cuales haya un medio nutritivo, extrayendo la película superficial de charcos o de agua estancadas…

PROCEDIMIENTO

ü  Se comenzará con la preparación de los colorantes.

1. El principal se obtiene mezclando a partes iguales una disolución de cristal de violeta en etanol con otra de oxalato amónico en agua destilada:

DISOLUCIÓN A                                            DISOLUCIÓN B

Cristal de violeta 2 gr.                                    Oxalacetato amónico: 0,8 gr.

Etanol al 90%: 20 ml.                                     Agua destilada: 80 ml.

2. Otro colorante es el lugol, que se prepara mezclando a partes iguales una disolución acuosa de yoduro potásico con otra disolución de yodo.

DISOLUCIÓN A                                            DISOLUCIÓN B

Yoduro potásico: 2 gr.                                    Yodo: 1 gr.

Agua destilada: 2 ml.                                      Agua destilada: 300 ml.

3. El tercer colorante se prepara disolviendo safranina en agua:

Safranina al 25% en disolución alcohólica: 10 ml.

Agua destilada: 1.000 ml.

ü  El proceso será el siguiente:

o   Colocar sobre un portaobjetos bien limpio una gota de la disolución de bacterias y extenderla.

o   Dejar secar al aire y luego fijar calentando (a menos de 60º C) el portaobjetos con una llama, cuidando de que no llegue a quemar si se deja sobre el dorso de la mano. En el caso de que se haya puesto un poco de yogur extendido es conveniente echar alcohol sobre el portaobjetos para que arrastre la grasa del yogur.

o   Teñir con el colorante de cristal de violeta (filtrado) durante 90 segundos.

o   Lavar con agua destilada

o   Teñir con lugol, durante 2 minutos.

o   Lavar abundantemente con etanol y añadir agua destilada para lavar el alcohol

o   Teñir con safranina durante 2 minutos y lavar con agua corriente

o   Secar suavemente sin frotar con papel de filtro y observar al microscopio

ü  Se observará la presencia de bacterias de color azul, Gram + y de color rojo las Gram -.

Nota: las bacterias Gram + poseen un tipo de pare en el cual aparece el ácido teicoico, carecen de fosfolípidos y son especialmente abundantes en derivados glucídicos. Todas las clases de bacterias permiten el pase de cristal de violeta, que las tiñe de azul, ya que el etanol no puede entrar a lavarlo. Las bacterias Gram – son decoloradas por el etanol y más tarde quedan teñidas de rojo por la safranina.

ANÁLISIS Y CONCLUSIONES

A)    Observa las preparaciones (1) y (2) utilizando en primer lugar el objetivo más pequeño (4 aumentos) enfocando con el macro. Pasa después al siguiente objetivo (10 aumentos) enfocando con el micro.

B)     Haz dibujos de todo lo que observes

C)     Interpreta tus observaciones de acuerdo con tus conocimientos sobre la estructura de la célula vegetal y sobre los procesos osmóticos